DpERK Whole-Mount Immunohistochemistry

本方法针对6-10天胚胎优化，重点在于快速固定以保持MAPK的双磷酸化状态，避免磷酸化信号丢失。固定条件需兼顾磷酸化表位的保存与抗体识别。全程低温操作以减少信号降解，采用特异性低交叉反应的二抗。通过梯度甲醇脱水复水及过氧化氢漂白，结合特异性一抗和生物素标记二抗孵育，最终利用荧光或酶标检测实现dpERK的空间表达定位。严格洗涤步骤确保信号特异性和背景降低。...