当前位置: 主页 > 生物技术 > 实验技术与方法

固体组织中曲霉半乳甘露聚糖的检测准备流程

2006-07-24 14:11 泉水 bioguider.com 阅读 0
核心摘要: 本文介绍了使用Platelia Aspergillus试剂盒检测固体组织中曲霉半乳甘露聚糖抗原的详细步骤,包括样本处理、匀浆制备、上清液提取及检测等关键环节,并强调了操作过程中的注意事项和安全防护措施。

Platelia Aspergillus(Biorad)是一种用于检测曲霉半乳甘露聚糖抗原的单步免疫酶联夹心微孔板试剂盒。

操作步骤

1. 在II级层流安全柜中,用无菌手术刀在培养皿中将样本细切。必须从多个方向(长度、宽度和对角线)切割样本,以破坏组织纤维,优化抗原提取。

2. 将小块样本转移到无菌玻璃匀浆器(1-5ml,根据样本体积)中,研磨至均匀的匀浆。

3. 加入等体积的超纯水,以帮助研磨并获得液体匀浆。

4. 将匀浆分装到一个或多个1.5ml无菌离心管中,每管1ml。

5. 涡旋振荡匀浆30秒。

6. 以1000g离心5分钟。

7. 用无菌吸头将上清液转移到另一管中。

8. 按照试剂盒说明书,使用与血清相同的检测技术分析上清液。

注意事项

由于Platelia测试的灵敏度极高(1ng/ml半乳甘露聚糖),必须尽量减少样本与灰尘/空气的接触,避免在操作过程中可能造成的污染,从而防止假阳性结果的出现。

所需设备

II级层流安全柜、无菌培养皿、无菌手术刀、无菌玻璃匀浆器、超纯水、1.5ml无菌离心管、涡旋振荡器、离心机、无菌吸头。

理想情况下应使用无热原设备,尽管按照制造商的建议,标准的无菌设备应该足够。

安全注意事项

在II级层流安全柜中进行操作,佩戴一次性手套。

    发表评论