全血淋巴细胞增殖试验（Whole Blood Lymphocyte Proliferation Assay）是一种用于评估细胞免疫状态的重要实验技术。该方法通过检测淋巴细胞对抗原或有丝分裂原的增殖反应，能够有效评估个体的免疫功能，特别是在药物试验、疫苗试验以及各种免疫相关疾病的研究中具有广泛的应用价值。
淋巴细胞增殖试验（LPA）已被广泛用于描述与多种先天性免疫缺陷相关的异常，以及由感染性疾病、癌症、衰老、营养不良、药物滥用、压力、手术、休克和自身免疫性疾病引起的继发性免疫缺陷。在AIDS临床试验组（ACTG）的研究议程中，全血LPA提供了一种适当且实用的方法，用于评估和监测细胞免疫状态，尤其适用于需要少量外周血的儿科药物试验。
该试验的原理基于激活的淋巴细胞倾向于分裂，而细胞分裂需要DNA合成。当提供外源性核苷时，淋巴细胞会将这些分子运输到细胞内，磷酸化后并入DNA。在生化水平上，该试验基于可溶性核苷转化为不溶性DNA聚合物的过程。通过测量掺入DNA的放射性核苷的量，可以评估淋巴细胞的增殖情况。
实验步骤包括以下关键环节：
1. 血液样本采集：使用肝素化的全血（绿色顶管）进行LPA试验。同时，需要使用三钾EDTA（紫色顶管）进行白细胞计数和分类分析。
2. 样本处理：全血样本应在室温（18-22°C）下保存，最好在采血后8小时内进行分析，但可以在采血后24小时内分析。
3. 试剂准备：包括RPMI 1640培养基、青霉素和链霉素、氚标记的胸腺嘧啶核苷（[³H]-TdR）、细胞培养级96孔板、生物可降解的闪烁液等。
4. 刺激剂准备：常用的刺激剂包括植物有丝分裂原（如PHA、PWM和Con A）、抗CD3单克隆抗体以及回忆抗原（如念珠菌抗原和破伤风类毒素）。
5. 实验操作：将稀释的全血（1:5）与刺激剂或培养基混合，在37°C、5% CO₂的湿润环境中孵育。孵育时间根据刺激剂的不同而有所不同，通常为3至7天。在孵育的最后一天，加入[³H]-TdR进行脉冲标记，然后使用细胞收集器将细胞收集到玻璃纤维滤纸上。
6. 数据分析：通过液体闪烁计数器测量滤纸上的放射性计数。数据可以表示为净计数（cpm实验 - cpm背景）或刺激指数（SI = cpm实验 / cpm背景）。