韩国江陵-原州国立大学环境与应用化学工程学院的研究人员正在开发一种两步酶法路线，用于生产生物柴油燃料，该过程可降低生产成本。该过程首先利用产生脂肪酶的细菌，然后结合使用商业化酶。这种组合策略具有双重优点：减少商业化酶的使用量，从而降低成本；同时减轻甲醇对酶的失活效应，这一问题此前阻碍了酶法生物柴油的商业化。

研究团队选用能产生脂肪酶的细菌——粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens），该菌株从被润滑脂污染的土壤中分离，并通过化学诱变提高其脂肪酶产量。具有最高脂肪酶活性的细菌经过再次诱变，进一步提升了脂肪酶活性。这些二次诱变菌株的胞内脂肪酶活性比野生型高出2.5倍。通过组合使用酶，并以甲醇作为酰基受体，可实现大豆油的反酯化反应。尽管这种生物催化剂受甲醇的抑制程度远低于商业化酶，但其生物柴油转化活性较低，因此仍需进一步改进。