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学术索引

BIBAC文库农杆菌质粒提取方案

本文详细描述了BIBAC文库中农杆菌质粒的提取方案,包括大单拷贝质粒和Ti质粒的分离步骤、试剂配方及注意事项。方案适用于C58菌株,对Ach5菌株回收率较低。内容涵盖培养、裂解、酚抽提、乙醇沉淀等关键步骤,并提供了LB、SOC、高蔗糖琼脂等培养基的配制方法,以及3-酮苷试验和Benedict试剂的制备。适用于分子生物学实验中农杆菌质粒的提取与纯化。...

2005-07-18 299 0

菌落质粒拯救实验方案

本文详细介绍了菌落质粒拯救实验方案,包括从酵母菌落中提取质粒并转化至大肠杆菌的完整步骤。内容涵盖缓冲液配制、细胞裂解、酚氯仿抽提、转化及培养等关键环节,并提供了试剂配方和操作提示,适用于分子生物学研究中的质粒筛选与扩增。...

2005-07-18 181 0

高效酵母质粒拯救方案

本文详细描述了高效酵母质粒拯救的实验步骤,包括酵母培养、玻璃珠破碎、碱裂解、柱纯化及转化大肠杆菌的关键操作。该方法适用于从酵母中快速提取质粒DNA,并高效转化至大肠杆菌,为分子克隆和基因功能研究提供可靠技术方案。...

2005-07-18 123 0

碱性裂解法质粒小型提取实验步骤

本文详细介绍了碱性裂解法质粒小型提取的实验步骤和配方,适用于分子生物学实验室中的质粒DNA提取操作,步骤包括细菌培养、离心、裂解、沉淀等,并提供了具体试剂配方。...

2006-07-24 40 0

质粒提取的原理

碱裂解法是制备质粒的常规技术,涉及多种溶液的使用,如溶液I(控制pH和抑制微生物生长)、溶液II(溶解细胞)和溶液III(沉淀蛋白质和DNA)。溶液II中的NaOH和SDS共同作用,导致细胞膜的相变,溶解细胞。溶液III中的高盐浓度导致SDS与钾离子置换,形成不溶性PDS,共沉淀蛋白质和DNA。碱处理时间和混合温度对质粒的稳定性至关重要。...

2006-03-02 3625 2

质粒提取:原理、方法与纯化技术详解

本文系统介绍了质粒提取的核心原理与实验步骤,包括细菌培养、细胞裂解(碱裂解法和煮沸裂解法)及质粒纯化(PEG沉淀法、氯化铯梯度离心等),并提供了小量及大量制备的详细方案。针对常见问题如酶切失败、无质粒DNA等给出了解决对策,适合分子生物学初学者及实验室参考。...

2005-04-05 2173 0
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