PLATE转化法是一种用于酵母（如酿酒酵母）的高效转化方法，通过聚乙二醇（PEG）和醋酸锂（LiAc）处理细胞，使其处于感受态，从而高效摄取外源DNA。该方法适用于质粒转化、基因敲除或整合等实验，具有操作简便、重复性好的特点。

实验步骤

1. 细胞培养与制备

挑取单个酵母菌落，接种于100 mL YPD培养基（或选择性培养基）中，30°C振荡培养过夜，至OD(600) = 1.0（0.6-1.8均可）。室温下2000 rpm离心5分钟收集细胞，弃上清。用10 mL TEL缓冲液重悬细胞，室温振荡过夜（可选，若无需保存细胞可跳过此步）。再次离心，弃上清，用1 mL TEL缓冲液重悬细胞，即为感受态细胞。细胞可在4°C保存，一个月内使用。

2. 转化操作

在无菌1.5 mL离心管中，加入100 μL感受态细胞、50 μg鲑鱼精DNA（通常为10 mg/mL溶液5 μL）和待转化DNA（通常为1 μg Qiagen纯化质粒或5 μL小提质粒；整合型构建体需更多DNA）。室温孵育30分钟。加入0.7 mL PLATE溶液，充分混匀，室温孵育1小时。42°C热激5-10分钟。将细胞涂布于适当的选择性平板上，30°C培养2-3天，直至菌落出现。

试剂配方

1× TEL缓冲液：10 mM Tris-HCl（pH 7.5），1 mM EDTA，0.1 M LiAc。

PLATE溶液：40% PEG 3350，0.1 M LiAc，10 mM Tris-HCl（pH 7.5），1 mM EDTA。

注意事项

1. 鲑鱼精DNA需预先煮沸变性，冷却后使用。2. 热激时间可根据酵母菌株优化。3. 转化效率受DNA质量、细胞生长状态等因素影响，建议设置阳性对照。