本文介绍一种高效的酵母快速转化方法，适用于实验室常规操作。该方案基于LiAc/PEG介导的化学转化，步骤简洁，可在短时间内获得转化子。

实验步骤

1. 取0.5 ml酵母培养物，在微量离心机中离心10秒。倒置离心管并轻甩一次以弃去上清。或者，用牙签从平板上挑取一个直径2-3 mm的菌落，转移至无菌的1.5 ml微量离心管中（只要平板未干透，从冰箱中保存3个月甚至更久的平板上的菌落均可使用）。

2. 加入10 μl载体DNA（100 μg）和1 μg转化DNA（溶于10 μl），充分涡旋混合。（如果转化DNA来自未经RNase处理的小量制备DNA，则无需添加载体DNA。）

3. 加入0.5 ml PLATE溶液，涡旋混合。

4. 加入57 μl DMSO，短暂涡旋。

5. 室温静置15分钟。

6. 42°C热激15分钟。

7. 在微量离心机中以10 krpm离心数秒，小心移除上清。

8. 向细胞沉淀中加入200 μl TE，用移液枪头轻轻吹吸重悬细胞。立即将悬液涂布于选择性平板上。

注意事项

- 转化子产量随转化DNA量线性增加，最高可达约100-200 μg。

- 每次转化的最佳细胞数约为2×10^8 cells/ml。细胞与DNA的总体积应约为140 μl。换言之，PLATE溶液与（细胞+DNA）的体积比应约为3.5:1。

试剂配方

PLATE溶液：40% PEG 3350，0.1 M LiAc，10 mM Tris-HCl (pH 7.5)，1 mM EDTA。