最近,中国协和医科大学(Peking Union Medical College)发表的一项研究详细描述了在大肠杆菌中克隆和表达与TPO(血小板生成素,thrombopoietin)模拟肽融合的人类干细胞因子(SCF)的过程。该研究旨在通过基因工程手段生产具有更高生物活性的重组融合蛋白,为血液疾病治疗提供潜在新药。
在造血作用和血小板生成(megakaryopoiesis)中,TPO与SCF协同作用,共同调控造血干细胞的增殖与分化。TPO是血小板生成的主要调节因子,而SCF则通过结合c-Kit受体促进造血干细胞的存活和扩增。在这项研究中,研究人员设计了与单体或二聚TPO模拟肽融合的SCF,两者之间通过一种柔性的肽连接子相连,以确保融合蛋白的正确折叠和功能。
实验结果显示,大肠杆菌DH5菌株成功表达了这种重组融合蛋白,其产量占细菌总蛋白的25%。研究人员通过稀释复性和色谱技术对蛋白进行纯化,获得了高纯度的融合蛋白。随后的生物活性测定表明,该融合蛋白比重组人SCF表现出更高的促增殖活性,提示其可能具有更好的临床应用潜力。
该研究的通讯作者陈博士及其同事将成果发表在《Biotechnology Letters》上,文章题为“Cloning and expression of human stem cell factor fused with thrombopoietin mimetic peptide in Escherichia coli”(Biotechnol Lett, 2006; 28(12):857-862)。这一工作为开发新型造血生长因子药物奠定了基础,尤其适用于血小板减少症和骨髓抑制等疾病的治疗。